PolyLC色譜柱分離蛋白的方法是基于蛋白質(zhì)的疏水特點,比如RPC,但是,HIC使用*含水的緩沖器,保留住了蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)和生物活性。這種分離性通常優(yōu)于RPC方法分離蛋白質(zhì)和多肽,能夠保留蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)。
通常情況下,樣品使用硫酸鹽或磷酸鹽等鹽濃度降低梯度洗脫,通過增加蛋白質(zhì)表面疏水性將其洗脫。表面活性劑(例如丙磺酸;辛基糖苷)如果必要的話可以被添加到流動相的。色譜柱比其他方法有更大的敏感性,尤其是涉及到非極性基團,適用于:
1、多維蛋白純化(建議順序:離子交換-鹽梯度洗滌分離-HIC)。
2、多肽的純化(比如毒液、糖肽類)。
3、表面抗體。
4、質(zhì)量控制分析蛋白質(zhì)的單一殘基的極性或者突變體的修飾位點。
PolyLC色譜柱應(yīng)用于對汽油,柴油,天然氣組分中的烷烴(同分異構(gòu)體除外)組成的分析,本柱是用新型進口固定相采用新工藝精心加工而成,每根柱子都經(jīng)過老化處理。