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細(xì)胞培養(yǎng)瓶的實(shí)驗(yàn)步驟介紹

日期:2020-09-23瀏覽:1361次

  細(xì)胞培養(yǎng)瓶濾膜蓋設(shè)計(jì)便于內(nèi)外氣體交換,有效防止污染,人體工學(xué)設(shè)計(jì),方便取用;短而寬的瓶頸,方便移液管和細(xì)胞鏟的出入。
  培養(yǎng)基或細(xì)胞懸液傾倒流暢,而不會(huì)引起細(xì)胞殘留損失和細(xì)胞污染。此外,圓管狀瓶口的非對(duì)稱鋸齒形截面的雙線螺紋設(shè)計(jì),使瓶蓋旋轉(zhuǎn)角度較小,自鎖性更好,轉(zhuǎn)動(dòng)順暢,擰緊和松開操作方便;且瓶蓋旋緊后受力均勻,瓶蓋的密封性能更好,降低了細(xì)胞污染幾率。
  細(xì)胞粘附性強(qiáng),具有更高的細(xì)胞貼壁率和細(xì)胞存活率;培養(yǎng)表面光潔,無(wú)劃痕或波浪紋等瑕疵;液體傾倒流暢,瓶蓋自鎖性好,使得瓶蓋密封性更好。
  當(dāng)培養(yǎng)一種新的細(xì)胞系時(shí)其原則按 1:2 和 1:4 的比例傳代細(xì)胞,在 3~4 天時(shí)間內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)以計(jì)算每毫升細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞在傳代后 24~36 小時(shí)細(xì)胞數(shù)會(huì)翻倍。傳代細(xì)胞密度低,細(xì)胞容易死亡,反映出細(xì)胞在達(dá)到增長(zhǎng)前有較長(zhǎng)滯留期。一旦細(xì)胞適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)條件冉?jīng)Q定備細(xì)胞株的佳接種密度。
  細(xì)胞培養(yǎng)瓶實(shí)驗(yàn)步驟
  1、 如果細(xì)胞未在轉(zhuǎn)瓶中培養(yǎng),只需搖晃、刮取或胰蛋白酶處埋,即可將細(xì)胞從細(xì)胞瓶表面分離下來(lái)。
  2、輕輕地吹打細(xì)胞(移液管上下吹打),將細(xì)胞團(tuán)吹散。
  3、取1ml 細(xì)胞懸液進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),勿讓細(xì)胞沉積在瓶底。輕輕來(lái)回轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞處于懸浮狀態(tài)。
  4、稀釋細(xì)胞,使其濃度約為每毫升 2x105~4x105。
  5、進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),并用臺(tái)盼藍(lán)排斥試驗(yàn)進(jìn)行細(xì)胞活力檢測(cè)。

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